KR101191724B1

KR101191724B1 - 대청엽 추출물을 함유하는 미백 및 주름개선용 조성물

Info

Publication number: KR101191724B1
Application number: KR1020100097655A
Authority: KR
Inventors: 이화동; 이가영; 손준호; 박태순; 김동희; 이한나
Original assignee: 재단법인 한국한방산업진흥원
Priority date: 2010-10-07
Filing date: 2010-10-07
Publication date: 2012-10-16
Also published as: KR20120036011A

Abstract

본 발명은 대청엽 (Isatis indigotica Fort) 추출물을 함유하는 조성물에 관한 것으로서, 상세하게는 본 발명의 대청엽 추출물은 티로시나제 및 엘라스티아제 활성 억제효과를 나타내는바, 미백 및 주름개선용 피부외용 약학 조성물 및 화장료 조성물로 이용될 수 있다.

Description

대청엽 추출물을 함유하는 미백 및 주름개선용 조성물{Composition comprising a leaf extract of Isatis indigotica Fort showing skin whitening and anti-wrinkle activity}

본 발명은 대청엽 (Isatis indigotica Fort) 추출물을 함유하는 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 피부외용 약학 조성물 및 화장료 조성물에 관한 것이다.

[문헌 1] 강병화, 한국생약자원생태도감, 2008, 379쪽

[문헌 2] Yagi A, Kanbara T, Morinobu N. The effect of tyrosinase inhibition for aloe. Planta Medica. 1986;3981:517-519.

[문헌 3] Cannell RJP, Kellan SJ, Owsianks AM, Walker JM. Results of a large scale screen of microalgae for the production of protease inhibitors. Planta Med. 1988;54(1):10-14.

피부색을 결정하는 데는 여러 요인들이 관여하는데 그 중에서도 가장 중요한 요인은 멜라닌 색소이다. 멜라닌 색소는 표피의 기저층에 존재하는 멜라닌세포 내에서 그 구성성분인 티로신에 티로시나아제란 효소가 작용함으로써 만들어진다. 티로시나아제에 의해 티로신이 산화되어 도파가 만들어지며 최종적으로 멜라닌 색소가 만들어진다. 또한 멜라닌 색소는 피부의 염증, 내분비이상, 신경성요인 등에 의해서도 만들어지고 특히 자외선에 쪼이면 멜라닌 세포의 작용이 강해진다. 기미를 포함한 피부의 이상색소침착의 원인인 멜라닌은 티로신이 티로시나아제의 촉매작용으로 산화반응을 일으켜 생성되나, 이때 반응성이 높은 활성산소가 존재하면 멜라닌 생성이 급격히 증가된다. 또 활성산소의 증가에 의해 교원섬유가 손상되며 이는 주름발생의 원인이 된다. 주름의 발생 원인의 80%가 자외선 때문이라는 말도 여기서 나온 것이다. 최근 레져인구의 증가로 외부에서 활동하는 것을 즐기는 사람들이 많아졌고 과거보다 외모에 관심이 더 많아지면서 자외선에 의한 피부의 색소침착 및 노화를 방지하기위한 요구가 많아지게 되었다. 이런 요구에 부응하기 위해 이전부터 아스코르빈산, 코지산, 알부틴, 하이드로퀴논, 글루타치온 또는 이들의 유도체, 또는 티로시나제 저해활성을 가진 물질들을 화장료나 의약품에 배합하여 사용하여 왔으나, 이들의 불충분한 미백효과, 피부노화 개선효과 미약, 피부에 대한 안전성 문제 등으로 인해 그 사용이 제한되고 있다. 이에 따라 대청엽의 분획 추출물로 미백효과와 주름개선에 효과를 가지면서 피부에 대한 안전성 문제를 극복하려 한다.

대청엽(Isatis indigotica Fort)은 십자화과에 속한 이년생 초본으로 원산이북의 바닷가에서 자란다. 높이 30~70cm 정도이고 분백색이다. 근생엽은 크고 경생엽은 긴 타원형 또는 타원상 피침형이며 끝이 뾰족하다. 황색의 꽃이 5~6월에 총상꽃차례에 핀다. 각과는 쐐기 같은 도피침형으로 끝이 뽀족하고 밑으로 처지며 흑색으로 익는다. 식용으로 이용하기도 한다. 전초는 ‘숭람’, 잎은 ‘대청엽’, 뿌리는 ‘판람근’이라하며 청열, 해독, 양혈소반, 유행성감기, 간염, 하리, 급성폐렴, 토혈, 구갈, 황달, 이질 등에 약으로 쓰인다.(강병화, 한국생약자원생태도감, 2008, 379쪽).

중약대사전에서는 노변청(路邊靑), 숭람(藍), 초대청(草大靑), 요람(蓼藍), 마람(馬藍) 등 5가지 식물의 잎이나 잎이 달린 어린가지도 모두 대청엽(大靑葉)이라고 부르며 약용한다.

본 발명에서는 대청엽 (Isatis indigotica Fort)의 미백 및 주름개선 효과를 확인하기 위하여 티로시나제 및 엘라스티아제 활성 억제효과를 확인하여 유의한 결과를 확인하여 본 발명을 완성하였다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 피부미백 및 주름 개선 효과를 갖는 대청엽 (Isatis indigotica Fort) 추출물을 함유하는 미백 및 주름 개선용 피부외용 약학 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 미백 및 주름개선 효과를 갖는 대청엽 (Isatis indigotica Fort) 추출물을 함유하는 피부미백 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본원에서 정의되는 대청엽의 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물임을 특징으로 한다.

본원에서 정의되는 조추출물은 정제수를 포함한 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 저급알코올 또는 이들의 혼합용매로부터 선택된 용매, 바람직하게는 물 및 에탄올 혼합용매, 보다 바람직하게는 60~90% 에탄올에 가용한 추출물을 포함한다.

본원에서 정의되는 극성용매 가용 추출물은 물, 메탄올, 부탄올 또는 이들의 혼합용매로부터 선택되어진 용매, 바람직하게는 물 또는 부탄올, 보다 바람직하게는 부탄올에 가용한 추출물을 포함한다.

본원에서 정의되는 비극성용매 가용 추출물은 헥산, 메틸렌 클로라이드, 클로로포름, 또는 에틸아세테이트, 바람직하게는 헥산, 메틸렌 클로라이드 또는 에틸아세테이트, 보다 바람직하게는, 헥산 또는 에틸아세테이트 용매에 가용한 추출물을 포함한다.

이하, 본 발명의 추출물을 수득하는 방법을 상세히 설명한다.

본 발명의 대청엽 추출물은 하기와 같이 제조될 수 있다. 대청엽을 세척 및 세절 후 60% 내지 90% 에탄올을 섞은 다음에 30℃ 내지 150℃, 바람직하게는 50℃ 내지 100℃의 온도에서 12시간 내지 5일, 바람직하게는 1일 내지 3일 동안 침적시켜 열수 추출, 환류냉각 추출, 초음파 추출 등의 추출방법, 바람직하게는 환류냉각 추출의 추출방법으로 1회 내지 5회 반복하여 추출물을 수득한 후, 감압여과하고 동결 건조하여 본 발명의 대청엽 조추출물을 수득할 수 있다.

또한, 본 발명의 극성용매 또는 비극성용매 가용 추출물은 상기에서 얻은 조추출물, 바람직하게는 60 내지 90% 에탄올 조추출물을 증류수에 현탁시킨 후, n-헥산, 에틸 아세테이트 및 n-부탄올을 이용한 통상적인 분획과정을 수행하여 n-헥산, 에틸 아세테이트 등의 비극성 용매에 가용한 비극성 용매 가용 추출 분획물; 및 n-부탄올, 물 등의 극성용매에 가용한 극성용매 가용 추출 분획물을 수득할 수 있다.

본 발명자들은 상기 제조방법으로 수득되는 대청엽 추출물을 대상으로 한 티로시나제 및 엘라스티아제 활성 억제효과를 확인함으로써 미백 및 주름개선 효과를 나타내는 피부외용 약학 조성물 및 화장료 조성물의 제공에 유용함을 확인하였다.

상기 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 내지 20중량%, 바람직하게는 0.01 내지 10 중량%로 함유하는 것을 특징으로 한다.

상기 추출물은 티로시나제 및 엘라스티아제 활성 억제효과를 확인한 결과 뛰어난 효과를 나타내었으며, 또한 피부에 적용시 안전성에도 문제가 없음을 확인할 수 있었다.

본 발명은 상기의 제조방법으로 수득한 대청엽 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백 및 주름 개선용 피부외용 약학조성물을 제공한다.

본 발명의 미백 및 주름 개선용 피부외용 약학조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 추출물을 0.1 내지 50 중량%로 포함한다.

본 발명의 추출물을 포함하는 피부외용 약학조성물은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 추출물을 포함하는 약학조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용 약학 조성물을 제공한다. 추출물을 포함하는 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 올리고당, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose) 또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 대청엽 추출물을 함유하는 미백 및 주름 개선용 조성물은 피부에 적용할 수 있는 피부 외용제 제형으로서 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용제 형태의 약학조성물로 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 추출물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 추출물은 1일 0.0001 내지 100㎎/㎏으로, 바람직하게는 0.001 내지 10㎎/㎏으로 투여하는 것이 좋다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 대청엽 추출물을 포함하는 조성물은 피부의 미백 및 주름 개선 효과를 위한 화장품 및 세안제 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는, 예를 들어, 각종 크림, 로션, 스킨 등과 같은 화장품류와 클렌징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등이 있다.

본 발명의 화장료는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 조성물을 포함한다.

수용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 B1, 비타민 B2, 비타민 B6, 피리독신, 염산피리독신, 비타민 B12, 판토텐산, 니코틴산, 니코틴산아미드, 엽산, 비타민 C, 비타민 H 등을 들 수 있으며, 그들의 염 (티아민염산염, 아스코르빈산나트륨염 등)이나 유도체 (아스코르빈산-2-인산나트륨염, 아스코르빈산-2-인산마그네슘염 등)도 본 발명에서 사용할 수 있는 수용성 비타민에 포함된다. 수용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 수득할 수 있다.

유용성 비타민으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 비타민 A, 카로틴, 비타민 D2, 비타민 D3, 비타민 E (d1-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤, d-알파 토코페롤) 등을 들 수 있으며, 그들의 유도체 (팔미틴산아스코르빈, 스테아르산아스코르빈, 디팔미틴산아스코르빈, 아세트산dl-알파 토코페롤, 니코틴산dl-알파 토코페롤비타민 E, DL-판토테닐알코올, D-판토테닐알코올, 판토테닐에틸에테르 등) 등도 본 발명에서 사용되는 유용성 비타민에 포함된다. 유용성 비타민은 미생물 변환법, 미생물의 배양물로부터의 정제법, 효소 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 취득할 수 있다.

고분자 펩티드로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 콜라겐, 가수 분해 콜라겐, 젤라틴, 엘라스틴, 가수 분해 엘라스틴, 케라틴 등을 들 수 있다. 고분자 펩티드는 미생물의 배양액으로부터의 정제법, 효소법 또는 화학 합성법 등의 통상의 방법에 의해 정제 취득할 수 있으며, 또는 통상 돼지나 소 등의 진피, 누에의 견섬유 등의 천연물로부터 정제하여 사용할 수 있다.

고분자 다당으로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 히드록시에틸셀룰로오스, 크산탄검, 히알루론산나트륨, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 (나트륨염 등) 등을 들 수 있다. 예를 들어, 콘드로이틴 황산 또는 그 염 등은 통상 포유 동물이나 어류로부터 정제하여 사용할 수 있다.

스핑고 지질로서는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 세라미드, 피토스핑고신, 스핑고당지질 등을 들 수 있다. 스핑고 지질은 통상 포유류, 어류, 패류, 효모 또는 식물 등으로부터 통상의 방법에 의해 정제하거나 화학 합성법에 의해 취득할 수 있다.

해초 엑기스로는 화장품에 배합 가능한 것이라면 어떠한 것이라도 되지만, 바람직하게는 갈조 엑기스, 홍조 엑기스, 녹조 엑기스 등을 들 수 있으며, 또, 이들의 해초 엑기스로부터 정제된 칼라기난, 아르긴산, 아르긴산나트륨, 아르긴산칼륨 등도 본 발명에서 사용되는 해초 엑기스에 포함된다. 해초 엑기스는 해초로부터 통상의 방법에 의해 정제하여 취득할 수 있다.

본 발명의 화장료에는 상기 필수 성분과 더불어 필요에 따라 통상 화장료에 배합되는 다른 성분을 배합해도 된다.

이외에 첨가해도 되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한(制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

유지 성분으로서는 에스테르계 유지, 탄화수소계 유지, 실리콘계 유지, 불소계 유지, 동물 유지, 식물 유지 등을 들 수 있다.

에스테르계 유지로서는 트리2-에틸헥산산글리세릴, 2-에틸헥산산세틸, 미리스틴산이소프로필, 미리스틴산부틸, 팔미틴산이소프로필, 스테아르산에틸, 팔미틴산옥틸, 이소스테아르산이소세틸, 스테아르산부틸, 리놀레산에틸, 리놀레산이소프로필, 올레인산에틸, 미리스틴산이소세틸, 미리스틴산이소스테아릴, 팔미틴산이소스테아릴, 미리스틴산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 세바신산디에틸, 아디핀산디이소프로필, 네오펜탄산이소알킬, 트리(카프릴, 카프린산)글리세릴, 트리2-에틸헥산산트리메틸롤프로판, 트리이소스테아르산트리메틸롤프로판, 테트라2-에틸헥산산펜타엘리슬리톨, 카프릴산세틸, 라우린산데실, 라우린산헥실, 미리스틴산데실, 미리스틴산미리스틸, 미리스틴산세틸, 스테아르산스테아릴, 올레인산데실, 리시노올레인산세틸, 라우린산이소스테아릴, 미리스틴산이소트리데실, 팔미틴산이소세틸, 스테아르산옥틸, 스테아르산이소세틸, 올레인산이소데실, 올레인산옥틸도데실, 리놀레산옥틸도데실, 이소스테아르산이소프로필, 2-에틸헥산산세토스테아릴, 2-에틸헥산산스테아릴, 이소스테아르산헥실, 디옥탄산에틸렌글리콜, 디올레인산에틸렌글리콜, 디카프린산프로필렌글리콜, 디(카프릴,카프린산)프로필렌글리콜, 디카프릴산프로필렌글리콜, 디카프린산네오펜틸글리콜, 디옥탄산네오펜틸글리콜, 트리카프릴산글리세릴, 트리운데실산글리세릴, 트리이소팔미틴산글리세릴, 트리이소스테아르산글리세릴, 네오펜탄산옥틸도데실, 옥탄산이소스테아릴, 이소노난산옥틸, 네오데칸산헥실데실, 네오데칸산옥틸도데실, 이소스테아르산이소세틸, 이소스테아르산이소스테아릴, 이소스테아르산옥틸데실, 폴리글리세린올레인산에스테르, 폴리글리세린이소스테아르산에스테르, 시트르산트리이소세틸, 시트르산트리이소알킬, 시트르산트리이소옥틸, 락트산라우릴, 락트산미리스틸, 락트산세틸, 락트산옥틸데실, 시트르산트리에틸, 시트르산아세틸트리에틸, 시트르산아세틸트리부틸, 시트르산트리옥틸, 말산디이소스테아릴, 히드록시스테아르산 2-에틸헥실, 숙신산디2-에틸헥실, 아디핀산디이소부틸, 세바신산디이소프로필, 세바신산디옥틸, 스테아르산콜레스테릴, 이소스테아르산콜레스테릴, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 올레인산콜레스테릴, 올레인산디히드로콜레스테릴, 이소스테아르산피트스테릴, 올레인산피트스테릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소세틸, 12-스테알로일히드록시스테아르산스테아릴, 12-스테알로일히드록시스테아르산이소스테아릴 등의 에스테르계 등을 들 수 있다.

탄화 수소계 유지로서는 스쿠알렌, 유동 파라핀, 알파-올레핀올리고머, 이소파라핀, 세레신, 파라핀, 유동 이소파라핀, 폴리부덴, 마이크로크리스탈린왁스, 와셀린 등의 탄화 수소계 유지 등을 들 수 있다.

실리콘계 유지로서는 폴리메틸실리콘, 메틸페닐실리콘, 메틸시클로폴리실록산, 옥타메틸폴리실록산, 데카메틸폴리실록산, 도데카메틸시클로실록산, 디메틸실록산ㆍ메틸세틸옥시실록산 공중합체, 디메틸실록산ㆍ메틸스테알록시실록산 공중합체, 알킬 변성 실리콘유, 아미노 변성 실리콘유 등을 들 수 있다.

불소계 유지로서는 퍼플루오로폴리에테르 등을 들 수 있다.

동물 또는 식물 유지로서는 아보카도유, 아르몬드유, 올리브유, 참깨유, 쌀겨유, 새플라워유, 대두유, 옥수수유, 유채유, 행인(杏仁)유, 팜핵유, 팜유, 피마자유, 해바라기유, 포도종자유, 면실유, 야자유, 쿠쿠이너트유, 소맥배아유, 쌀 배아유, 시아버터, 월견초유, 마커데이미아너트유, 메도홈유, 난황유, 우지(牛脂), 마유, 밍크유, 오렌지라피유, 호호바유, 캔데리러왁스, 카르나바왁스, 액상 라놀린, 경화피마자유 등의 동물 또는 식물 유지를 들 수 있다.

보습제로서는 수용성 저분자 보습제, 지용성 분자 보습제, 수용성 고분자, 지용성 고분자 등을 들 수 있다.

수용성 저분자 보습제로서는 세린, 글루타민, 솔비톨, 만니톨, 피롤리돈-카르복실산나트륨, 글리세린, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜B(중합도 n = 2 이상), 폴리프로필렌글리콜(중합도 n = 2 이상), 폴리글리세린B(중합도 n = 2 이상), 락트산, 락트산염 등을 들 수 있다.

지용성 저분자 보습제로서는 콜레스테롤, 콜레스테롤에스테르 등을 들 수 있다.

수용성 고분자로서는 카르복시비닐폴리머, 폴리아스파라긴산염, 트라가칸트, 크산탄검, 메틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시에틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 카르복시메틸셀룰로오스, 수용성 키틴, 키토산, 덱스트린 등을 들 수 있다.

지용성 고분자로서는 폴리비닐피롤리돈ㆍ에이코센 공중합체, 폴리비닐피롤리돈ㆍ헥사데센 공중합체, 니트로셀룰로오스, 덱스트린지방산에스테르, 고분자 실리콘 등을 들 수 있다.

에몰리엔트제로서는 장쇄아실글루타민산콜레스테릴에스테르, 히드록시스테아르산콜레스테릴, 12-히드록시스테아르산, 스테아르산, 로진산, 라놀린지방산콜레스테릴에스테르 등을 들 수 있다.

계면 활성제로서는 비이온성 계면 활성제, 음이온성 계면 활성제, 양이온성 계면 활성제, 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

비이온성 계면 활성제로서는 자기 유화형 모노스테아르산글리세린, 프로필렌글리콜지방산에스테르, 글리세린지방산에스테르, 폴리글리세린지방산에스테르, 솔비탄지방산에스테르, POE (폴리옥시에틸렌)솔비탄지방산에스테르, POE 솔비트지방산에스테르, POE 글리세린지방산에스테르, POE 알킬에테르, POE 지방산에스테르, POE 경화피마자유, POE 피마자유, POEㆍPOP (폴리옥시에틸렌ㆍ폴리옥시프로필렌) 공중합체, POEㆍPOP 알킬에테르, 폴리에테르변성실리콘, 라우린산알카놀아미드, 알킬아민옥시드, 수소첨가대두인지질 등을 들 수 있다.

음이온성 계면 활성제로서는 지방산비누, 알파-아실술폰산염, 알킬술폰산염, 알킬알릴술폰산염, 알킬나프탈렌술폰산염, 알킬황산염, POE 알킬에테르황산염, 알킬아미드황산염, 알킬인산염, POE 알킬인산염, 알킬아미드인산염, 알킬로일알킬타우린염, N-아실아미노산염, POE 알킬에테르카르복실산염, 알킬술포숙신산염, 알킬술포아세트산나트륨, 아실화 가수분해 콜라겐펩티드염, 퍼플루오로알킬인산에스테르 등을 들 수 있다.

양이온성 계면 활성제로서는 염화알킬트리메틸암모늄, 염화스테아릴트리메틸암모늄, 브롬화스테아릴트리메틸암모늄, 염화세토스테아릴트리메틸암모늄, 염화디스테아릴디메틸암모늄, 염화스테아릴디메틸벤질암모늄, 브롬화베헤닐트리메틸암모늄, 염화벤잘코늄, 스테아르산디에틸아미노에틸아미드, 스테아르산디메틸아미노프로필아미드, 라놀린 유도체 제 4급 암모늄염 등을 들 수 있다.

양성 계면 활성제로서는 카르복시베타인형, 아미드베타인형, 술포베타인형, 히드록시술포베타인형, 아미드술포베타인형, 포스포베타인형, 아미노카르복실산염형, 이미다졸린 유도체형, 아미드아민형 등의 양성 계면 활성제 등을 들 수 있다.

유기 및 무기 안료로서는 규산, 무수규산, 규산마그네슘, 탤크, 세리사이트, 마이카, 카올린, 벵갈라, 클레이, 벤토나이트, 티탄피막운모, 옥시염화비스무트, 산화지르코늄, 산화마그네슘, 산화아연, 산화티탄, 산화알루미늄, 황산칼슘, 황산바륨, 황산마그네슘, 탄산칼슘, 탄산마그네슘, 산화철, 군청, 산화크롬, 수산화크롬, 칼라민 및 이들의 복합체등의 무기 안료 ; 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐수지, 요소수지, 페놀수지, 불소수지, 규소수지, 아크릴수지, 멜라민수지, 에폭시수지, 폴리카보네이트수지, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 실크파우더, 셀룰로오스, CI 피그먼트옐로우, CI 피그먼트오렌지 등의 유기 안료 및 이들의 무기 안료와 유기 안료의 복합 안료 등을 들 수 있다.

유기 분체로서는 스테아르산칼슘 등의 금속비누 ; 세틸린산아연나트륨, 라우릴린산아연, 라우릴린산칼슘 등의 알킬인산금속염 ; N-라우로일-베타-알라닌칼슘, N-라우로일-베타-알라닌아연, N-라우로일글리신칼슘 등의 아실아미노산 다가금속염 ; N-라우로일-타우린칼슘, N-팔미토일-타우린칼슘 등의 아미드술폰산 다가금속염 ; N-엡실론-라우로일-L-리진, N-엡실론-팔미토일리진, N-알파-파리토일올니틴, N-알파-라우로일아르기닌, N-알파-경화우지지방산아실아르기닌 등의 N-아실염기성아미노산 ; N-라우로일글리실글리신 등의 N-아실폴리펩티드 ; 알파-아미노카프릴산, 알파-아미노라우린산 등의 알파-아미노지방산 ; 폴리에틸렌, 폴리프로필렌, 나일론, 폴리메틸메타크릴레이트, 폴리스티렌, 디비닐벤젠ㆍ스티렌 공중합체, 사불화에틸렌 등을 들 수 있다.

자외선 흡수제로서는 파라아미노벤조산, 파라아미노벤조산에틸, 파라아미노벤조산아밀, 파라아미노벤조산옥틸, 살리실산에틸렌글리콜, 살리신산페닐, 살리신산옥틸, 살리신산벤질, 살리신산부틸페닐, 살리신산호모멘틸, 계피산벤질, 파라메톡시계피산-2-에톡시에틸, 파라메톡시계피산옥틸, 디파라메톡시계피산모노-2-에틸헥산글리세릴, 파라메톡시계피산이소프로필, 디이소프로필ㆍ디이소프로필계피산에스테르 혼합물, 우로카닌산, 우로카닌산에틸, 히드록시메톡시벤조페논, 히드록시메톡시벤조페논술폰산 및 그 염, 디히드록시메톡시벤조페논, 디히드록시메톡시벤조페논디술폰산나트륨, 디히드록시벤조페논, 테트라히드록시벤조페논, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 2,4,6-트리아닐리노-p-(카르보-2'-에틸헥실-1'-옥시)-1,3,5-트리아진, 2-(2-히드록시-5-메틸페닐)벤조트리아졸 등을 들 수 있다.

살균제로서는 히노키티올, 트리클로산, 트리클로로히드록시디페닐에테르, 크로르헥시딘글루콘산염, 페녹시에탄올, 레조르신, 이소프로필메틸페놀, 아줄렌, 살리칠산, 진크필리티온, 염화벤잘코늄, 감광소 301 호, 모노니트로과이어콜나트륨, 운데시렌산 등을 들 수 있다.

산화 방지제로서는 부틸히드록시아니솔, 갈릭산프로필, 엘리소르빈산 등을 들 수 있다.

pH 조정제로서는 시트르산, 시트르산나트륨, 말산, 말산나트륨, 프말산, 프말산나트륨, 숙신산, 숙신산나트륨, 수산화나트륨, 인산일수소나트륨 등을 들 수 있다.

알코올로서는 세틸알코올 등의 고급 알코올을 들 수 있다.

또한, 이외에 첨가해도 되는 배합 성분은 이에 한정되는 것은 아니며, 또, 상기 어느 성분도 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 배합 가능하지만, 총중량에 대하여 바람직하게는 0.01 - 5 % 중량 백분율, 보다 바람직하게는 0.01 - 3 % 중량 백분율로 배합된다.

본 발명의 화장료는 용액, 유화물, 점성형 혼합물 등의 형상을 취할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효성분으로서 상기 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제 및 담체를 포함한다.

본 발명의 미백 및 주름 개선용 기능성 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 유액, 크림, 화장수, 팩, 파운데이션, 로션, 미용액, 모발화장료 등을 들 수 있다.

구체적으로, 본 발명의 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저의 제형을 포함한다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

상술한 바와 같이, 본 발명의 대청엽 추출물을 함유하는 조성물은 티로시나제 및 엘라스티아제 활성 억제 효과를 나타내는바, 미백방지 및 주름개선용 피부외용 약학 조성물 및 화장료 조성물로 사용될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.

실시예 1. 대청엽의 추출 및 분획

1-1. 대청엽 조추출물의 분리(1)

대청엽(중국 하북성, 휴먼허브(http://www.humanherb.co.kr/)) 10g을 잘게 세절하여 20% 에틸알코올 500mL에 넣고 실온에서 2일간 침적시켜 3반복 추출한 후 침전물을 여과지로 여과하고 40℃에서 감압 하에 완전히 농축하여 20% 에틸알코올 대청엽 추출물(이하 “IT-20” 라 명명 함) 건조 중량 3.40g을 수득하였다.

1-2. 대청엽 조추출물의 분리(2)

대청엽(중국 하북성, 휴먼허브(http://www.humanherb.co.kr/)) 10g을 잘게 세절하여 50% 에틸알코올 500mL에 넣고 실온에서 2일간 침적시켜 3반복 추출한 후 침전물을 여과지로 여과하고 40℃에서 감압 하에 완전히 농축하여 50% 에틸알코올 대청엽 추출물(이하 “IT-50” 라 명명 함) 건조 중량 2.96g을 수득하였다.

1-3. 대청엽 조추출물의 분리(3)

대청엽(중국 하북성, 휴먼허브(http://www.humanherb.co.kr/)) 10g을 잘게 세절하여 80% 에틸알코올 500mL에 넣고 실온에서 2일간 침적시켜 3반복 추출한 후 침전물을 여과지로 여과하고 40℃에서 감압 하에 완전히 농축하여 80% 에틸알코올 대청엽 추출물(이하 “IT-80” 라 명명 함) 건조 중량 1.630g을 수득하였다.

1-4. 대청엽 조추출물의 분리(4)

대청엽(중국 하북성, 휴먼허브(http://www.humanherb.co.kr/)) 10g을 잘게 세절하여 100% 에틸알코올 500mL에 넣고 실온에서 2일간 침적시켜 3반복 추출한 후 침전물을 여과지로 여과하고 40℃에서 감압 하에 완전히 농축하여 100% 에틸알코올 대청엽 추출물(이하 “IT-100” 라 명명 함) 건조 중량 1.89g을 수득하였다.

1-5. 대청엽 조추출물의 분리(5)

대청엽(중국 하북성, 휴먼허브(http://www.humanherb.co.kr/)) 10g을 잘게 세절하여 프레탄올(주정) 500mL에 넣고 실온에서 2일간 침적시켜 3반복 추출한 후 침전물을 여과지로 여과하고 40℃에서 감압 하에 완전히 농축하여 프레탄올 대청엽 추출물(이하 “IT-pre” 라 명명 함) 건조 중량 2.02g을 수득하였다.

1-6. 대청엽 조추출물의 분리(6)

대청엽(중국 하북성, 휴먼허브(http://www.humanherb.co.kr/)) 10g을 잘게 세절하여 100% 메틸알코올 500mL에 넣고 실온에서 2일간 침적시켜 3반복 추출한 후 침전물을 여과지로 여과하고 40℃에서 감압 하에 완전히 농축하여 100% 메틸알코올 대청엽 추출물(이하 “IT-MeOH” 라 명명 함) 건조 중량 2.38g을 얻었다.

1-7. 극성 용매 및 비극성용매 가용 추출물의 분획

상기 방법으로 제조된 대청엽 80% 에틸알코올 추출물을 증류수에 현탁시킨 후 노르말 헥산 (n-hexane), 에칠아세테이트 (EtOAc), 노르말 부탄올 (n-BuOH)로 순차적으로 계통분리를 하여 노르말 헥산 분획물(이하 “PIT-HE” 라 명명 함) 1.26g, 에칠아세테이트 분획물(이하 “PIT-EA” 라 명명 함) 0.97g, 노르말 부탄올 분획물(이하 “PIT-BU” 라 명명 함) 2.77g, 물 분획물(이하 “PIT-WA” 라 명명 함) 50g을 각각 획득하였다.

실험예 1. 티로시나제 ( Tyrosinase ) 저해활성 측정

상기 실시예에서 수득한 시료들의 티로시나제(Tyrosinase) 저해활성을 측정하기 위하여 Yagi 등의 방법을 응용하여 실험을 실시하였다(Yagi A, Kanbara T, Morinobu N. The effect of tyrosinase inhibition for aloe. Planta Medica. 1986;3981:517-519).

반응구는 0.175M sodium phosphate buffer(pH 6.8) 0.5㎖에 10mM L-DOPA를 녹인 기질액 0.2㎖ 및 시료용액 0.1㎖의 혼합액에 머쉬룸 티로시나제(mushroom tyrosinase)(110U/㎖) 0.2㎖을 첨가하여 25℃에서 2분간 반응시켜 반응액 중에 생성된 DOPA chrome을 475nm에서 측정하였다. 티로시나제(Tyrosinase) 저해활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다. 각각 시료의 티로시나제 활성 억제효과는 하기 수학식 1로 구하였다.

상기 실험 결과, 대청엽 추출물 중 티로시나제 활성 저해 효과는 80% 에탄올 추출물이 다른 조건의 추출물에 비해 42.15%의 높은 효과를 보였다(표 1 참조).

실험농도(1mg/ml)
Tyrosinase	IT-20	IT-50	IT-80	IT-100	IT-pre	IT-MeOH
Inhibition rate(%)	12.5	11.66	42.15	4.82	0.42	4.72

실험예 2. 엘라스티아제 ( Elastase ) 저해활성 측정

상기 실시예에서 수득한 시료들의 엘라스티아제(Elastase) 저해활성을 측정하기 위하여 Cannell 등의 방법을 응용하여 실험을 실시하였다(Cannell RJP, Kellan SJ, Owsianks AM, Walker JM. Results of a large scale screen of microalgae for the production of protease inhibitors. Planta Med. 1988;54(1):10-14).

기질로서 N-succinyl-(L-Ala)3-p-nitroanilide를 사용하여 37℃에서 20분간 기질로부터 생성되는 p-nitroanilide의 생성량을 445nm에서 측정하였다. 즉, 각 시험용액을 일정 농도가 되도록 조제하여 0.5㎖씩 시험관에 취하고, 50mM tris-HCl buffer(pH 8.6)에 녹인 porcine pancreas elastase(2.5U/㎖)용액 0.5㎖을 가한 후 기질로 50mM tris-HCl buffer(pH 8.6)에 녹인 N-succinyl-(L-Ala)3-p-nitroanilide(0.5㎎/㎖)을 첨가하여 20분간 반응시켜 측정하였다. 엘라스티아제(Elastase) 저해활성은 하기 수학식 2와 같이 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다.

상기 실험 결과, 대청엽 추출물 중 엘라스티아제 활성 저해 효과는 80% 에탄올 추출물이 다른 조건의 추출물에 비해 20.61%의 높은 효과를 보이고 있다(표 2 참조).

실험농도(1mg/ml)
Elastase	IT-20	IT-50	IT-80	IT-100	IT-pre	IT-MeOH
Inhibition rate(%)	6.47	2.05	20.61	-0.9	6.77	0.83

실험예 3. 티로시나제(Tyrosinase)와 엘라스티아제 ( Elastase ) 활성저해 효과 측정

상기 실시예에서 수득한 시료들의 티로시나제(Tyrosinase)와 엘라스티아제(Elastase) 활성저해 효과를 측정하기 위하여 하기와 같이 문헌에 개시된 방법을 응용하여 실험을 실시하였다(Yagi A, Kanbara T, Morinobu N. The effect of tyrosinase inhibition for aloe. Planta Medica. 1986;3981:517-519 ; Cannell RJP, Kellan SJ, Owsianks AM, Walker JM. Results of a large scale screen of microalgae for the production of protease inhibitors. Planta Med. 1988;54(1):10-14).

대청엽 5kg을 80% 에틸알코올 36L에 넣고 실온에서 2일간 침적시켜 3반복 추출한 후 침전물을 여과지로 여과하고 40℃에서 감압 하에 완전히 농축하여 건조 중량 818g을 얻었다. 이중 600g을 사용하여 노르말 헥산(75.89g), 에칠아세테이트(57.11g), 노르말 부탄올(166g), 물층(301g)으로 계통분리 한 후, 감압하에 농축하고 동결건조하여 각각의 층들의 분획물을 얻었다.

각각의 분획물에 대해 상기 실험예 1,2와 동일한 방법으로 티로시나제와 엘라스티아제 활성저해 효과를 측정하였다.

상기 실험 결과, 대청엽 추출물 중 에틸아세테이트 분획물이 다른 분획물에 비해 엘라스티나제와 티로시나제 활성저해 효과를 보이고 있는 것을 확인할 수 있었다(표 3 참조).

실험농도(1mg/ml)
Inhibition rate(%)	추출물	PIT-HE	PIT-EA	PIT-BU	PIT-WA
Elastase	20.61	5.32	52.46	40.19	6.97
Tyrosinase	42.15	20.7	65.29	38.66	34.33

본 발명의 대청엽 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제제의 예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.

제조예 1. 유연 화장수( 스킨 )의 제조

대청엽 에틸알코올 추출물을 함유한 화장료 중 유연 화장수(스킨)의 제조예를 표 1에 나타내었다.

제조예 2. 영양화장수(로션)의 제조

대청엽 에틸알코올 추출물을 함유한 화장료 중 영양화장수(로션)의 제조예를 표 2에 나타내었다.

제조예 3. 영양크림의 제조

대청엽 에틸알코올 추출물을 함유한 화장료 중 영양크림의 제조예를 표 3에 나타내었다.

제조예 4. 에센스의 제조

대청엽 에탈알코올 추출물을 함유한 화장료 중 에센스의 제조 예를 표 4에 나타내었다.

제조예 5. 유화형 파운데이션의 제조

대청엽 에틸아세테이트 분획물을 함유한 화장료 중 유화형 파운데이션의 제조예를 표 5에 나타내었다.

제조예 6. 친수성 연고제의 제조

Claims

대청엽(Isatis indigotica Fort)을 세척 및 세절 후 60% 내지 90% 에탄올을 섞은 다음에 50℃ 내지 100℃의 온도에서 1일 내지 3일 동안 침적시켜 환류냉각 추출의 추출방법으로 1회 내지 5회 반복하여 추출물을 수득한 후, 감압여과하고 동결 건조하여 대청엽 조추출물을 수득하는 제 1단계; 상기 조추출물을 증류수에 현탁시킨 후, 에틸 아세테이트을 이용한 분획과정을 수행하는 제 2단계 공정으로 수득되는 대청엽의 에틸 아세테이트 가용 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백 및 주름개선용 피부 외용 약학조성물.
삭제
삭제
삭제
삭제
제 1항에 있어서, 상기 조성물은 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제 제형인 피부외용 약학조성물.
대청엽(Isatis indigotica Fort)을 세척 및 세절 후 60% 내지 90% 에탄올을 섞은 다음에 50℃ 내지 100℃의 온도에서 1일 내지 3일 동안 침적시켜 환류냉각 추출의 추출방법으로 1회 내지 5회 반복하여 추출물을 수득한 후, 감압여과하고 동결 건조하여 대청엽 조추출물을 수득하는 제 1단계; 상기 조추출물을 증류수에 현탁시킨 후, 에틸 아세테이트을 이용한 분획과정을 수행하는 제 2단계 공정으로 수득되는 대청엽의 에틸 아세테이트 가용 추출 분획물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백 및 주름개선용 화장료 조성물.
제 7항에 있어서, 상기 조성물은 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스쳐 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처크림, 핸드크림, 파운데이션, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클린저의 제형으로 구성된 그룹에서 선택된 제형임을 특징으로 하는 화장료 조성물.